ADN complémentaire
L’ADN complémentaire (ou ADNc, Acide désoxyribonucléique complémentaire) est un simple brin artificiellement synthétisé à partir d'un ARNm, représentant ainsi la partie codante de la région du génome ayant été transcrit en cet ARNm. Il est obtenu après une réaction de transcription inverse d'un ARNm mature et équivaut donc à la copie ADN de l'ARNm qui a été extrait dans une cellule donnée à un moment donné. L'ADNc double brin résulte de la copie du premier brin par une ADN polymérase.

L'ADNc est aussi l'ADN produit in vitro, par la transcription in vitro, et sa séquence de bases est complémentaire à un ARNm particulier. L'ADN complémentaire est utilisé pour étudier l'expression des gènes parce qu'il est plus stable que l'ARN et plus facile à utiliser dans les techniques de clonage de protéines recombinantes.
Chez les eucaryotes, l'ADNc est différent de l'ADN car il ne contient pas les introns (parties non traduites de l'ADN eucaryote) qui sont épissés après la transcription de l'ARNm.
Synthèse
modifierPour synthétiser un ADNc, l’ARNm associé à la séquence cible est extraite et il est placé avec une amorce associé afin de réaliser une copie de ce dernier grâce à la transcriptase inverse. L’ADNc monocaténaire ensuite obtenu est donc dépourvu d’introns et subit un traitement alcalin permettant de dégrader l’ARNm associé. Il est possible d’utiliser une ADN polymerase qui se sert de la boucle présente sur l’extrémité 3’ de l’ADNc monocaténaire en guise d’amorce, un ADNc bicaténaire avec une boucle sur une des extrémité est alors obtenu. L’utilisation d’une nucléase S1 permet de cliver la boucle présente sur cette extrémité pour avoir une copie conforme en ADNc bicaténaire de l’ARNm original
Applications
modifierL'ADNc obtenue par transcription inverse, permet de déterminer quels gènes sont actifs dans différents types cellulaires. En effet, chaque cellule d'un organisme possède la même information génétique (à quelques mutations près) mais chaque type cellulaire exprime différents gènes, sous la forme d'ARN puis de protéine (théorie fondamentale de biologie moléculaire). Ainsi en extrayant les ARN d'une cellule et en les transformant en ADNc, on peut observer les gènes actifs, par rapport au type cellulaire et aux conditions physiologiques dans laquelle était la cellule.
Notes et références
modifierLiens externes
modifier- Ressource relative à la santé :
